Rosa Isela García Ríos

 
 ROSA ISELA GARCÍA RÍOS
 Profesora Docente Titular A
 rosaisela.garcia@academicos.udg.mx
 Disciplina (PRODEP): Modelado Molecular
 Scholar GoogleResearchGateOrcid
 


Semblanza

Licenciada en QFB, Maestra y Doctora en Neuroetología en la Universidad Veracruzana. Estancia Posdoctoral en el CULagos de la UdG. Docente desde 2010 a la fecha. SNI nivel 1 de 2015-2021. Perfil PRODEP. Ha dirigido tesis de licenciatura y posgrado. Ponente en más de 13 congresos. Publicación de artículos, capítulos de libro y libro. Línea de investigación “Neurofarmacología conductual de principios activos y sintéticos en la ansiedad y la depresión”. Participa como divulgador de la ciencia.


Información PRODEP 

  • Área: Ciencias de la Salud
  • Disciplina: Neurociencias

Investigación 

  • Laboratorio: Ciencias Biomédicas
  • Cuerpo Académico: Neurociencias y fitofarmacología
  • Departamento: Departamento de Ciencias de la Tierra y de la Vida
  • Intereses y Líneas de Investigación: 
    • Neurofarmacología conductual de principios activos y sintéticos en la ansiedad y la depresión.

Proyectos de investigación vigentes



Análisis farmacológico del efecto antidepresivo y ansiolítico de la infusión de las hojas de Justicia spicigera

Descripción del proyecto de Investigación

Estudios etnofarmacológicos seleccionan la dosis inicial y forma de preparación tradicional de una planta. Su eficacia se evalúa en modelos animales validados, como el laberinto de brazos elevados (ansiedad) y la prueba de nado forzado (depresión).

Posteriormente, la neurofarmacología investiga los mecanismos subyacentes del efecto. Esto incluye usar antagonistas de receptores para identificar sistemas de neurotransmisión y analizar cambios neuroquímicos en zonas cerebrales clave para las emociones.

Finalmente, el análisis fitoquímico identifica los metabolitos responsables del efecto biológico. Este abordaje integral, que combina fitoquímica, farmacología y neurociencia, es esencial para comprender el potencial terapéutico y las aplicaciones clínicas de plantas como Justicia spicigera.

Fuente de Financiamiento

PROSNI, PROAC, 

Fecha (año) de inicio de la Investigación

2018

Co-autores

Dr. Armando Mora Pérez y Dr. Cesar Soria Fregozo


Proyectos de investigación relevantes

Estudio neurofarmacologico de la respuesta antidepresiva a fármacos naturales y sintéticos en un modelo de menopausia quirúrgica a nivel preclínico.

Descripción del proyecto de Investigación

El estudio investiga la respuesta antidepresiva a fármacos naturales y sintéticos utilizando un modelo preclínico de menopausia quirúrgica.

Este modelo simula los cambios hormonales que pueden inducir síntomas depresivos en mujeres, permitiendo evaluar el potencial terapéutico de distintas sustancias bajo estas condiciones específicas.

La neurofarmacología se centra en comprender los mecanismos de acción de los tratamientos. Esto implica:

Identificar los sistemas de neurotransmisión (como serotonina o noradrenalina) que median el efecto antidepresivo.

Analizar los cambios neuroquímicos y moleculares en áreas cerebrales clave (como el hipocampo o la corteza prefrontal) que modulan el estado de ánimo.

En resumen, este abordaje busca generar conocimiento fundamental sobre cómo los tratamientos actúan a nivel cerebral para aliviar la depresión asociada a la menopausia, abriendo camino a nuevas terapias más dirigidas para esta población.

Fuente de Financiamiento

PROSNI

Fecha (año) de inicio de la Investigación

2018

Co-autores

Dr. Armando Mora Pérez y Dr. Cesar Soria Fregozo

 



Anxiolytic-like effect of the aqueous extract of Justicia spicigera leaves on female rats: A comparison to diazepam.

Descripción del proyecto de Investigación

El muicle (Justicia spicigera) se usa tradicionalmente en México para tratar problemas menstruales y el nerviosismo. Dado que la ansiedad es una causa principal de discapacidad, se investigó su potencial ansiolítico.

El objetivo fue analizar el efecto ansiolítico del extracto acuoso de hojas de muicle (EAHM) y la influencia del ciclo estral en ratas Wistar. Se emplearon las pruebas de laberinto en cruz elevado y campo abierto, usando diazepam como referencia.

La dosis de 12 mg/kg de EAHM mostró un efecto similar al ansiolítico en las ratas, especialmente durante las fases de proestro-estro (P-E), aumentando las entradas y el tiempo en los brazos abiertos, y reduciendo el índice de ansiedad. No afectó la actividad locomotora.

El extracto contiene flavonoides, esteroles y terpenos. Se concluye que el efecto ansiolítico observado en ambas fases del ciclo estral de la rata podría deberse a la presencia de estos metabolitos.

Fecha (año) de inicio de la Investigación

2018

Fecha (año) de fin de la Investigación

2020

Co-autores

Rosa Isela García Ríos, Armando Mora Pérez, Daniel González Torres, Ricardo de Jesús Carpio Reyes, Cesar Soria Fregozo

 



Neuropharmacology of Secondary Metabolites from Plants with Anxiolytic and Antidepressant Propertieslevantes

Descripción del proyecto de Investigación

Se revisan metabolitos secundarios de plantas, como alcaloides, terpenos, flavonoides y esteroles, que muestran efectos ansiolíticos y antidepresivos en estudios clínicos y experimentales. Estos actúan sobre receptores GABAA y modulan los sistemas serotoninérgico, noradrenérgico y dopaminérgico, similares a fármacos convencionales. Debido a su estructura semejante a las monoaminas, pueden unirse a sus receptores, lo que evidencia su potencial terapéutico para tratar trastornos emocionales mediante la regulación de la neurotransmisión.

Fecha (año) de inicio de la Investigación

2019

Fecha (año) de fin de la Investigación

2020

Co-autores

Rosa Isela García Ríos, Armando Mora Pérez, Ana Raquel Ramos Molina, Cesar Soria Fregozo

 



Estrogenic Effect of Probiotics on Anxiety and Depression: A Narrative Review

Descripción del proyecto de Investigación

Se aborda la relación entre la ansiedad, la depresión y el eje microbiota–intestino–cerebro, destacando su influencia en la producción de neurotransmisores como serotonina, GABA y dopamina. Señala que este eje también modula el metabolismo hormonal mediante enzimas como la β-glucuronidasa, afectando el estado de ánimo, especialmente en mujeres con fluctuaciones hormonales. Estudios preclínicos y clínicos muestran que el consumo de probióticos mejora conductas relacionadas con ansiedad y depresión, particularmente durante la menopausia o el síndrome premenstrual. Sin embargo, se requieren investigaciones controladas a largo plazo y estrategias personalizadas que integren tecnologías ómicas y de neuroimagen para optimizar terapias mentales.

Fecha (año) de inicio de la Investigación

2025

Fecha (año) de fin de la Investigación

2025

Co-autores

Gilberto Uriel Rosas-Sánchez, León Jesús Germán-Ponciano, Juan Francisco Rodríguez-Landa, Herlinda Bonilla-Jaime, Ofelia Limón-Morales, Rosa Isela García-Ríos, José Luis Muñoz-Carrillo, Oscar Gutiérrez-Coronado, Paola Trinidad Villalobos-Gutiérrez, César Soria-Fregozo

 



Depression and Serotonergic Changes during the Climacteric and Postmenopausal Stages: Hormonal Influences

Descripción del proyecto de Investigación

Se analiza la relación entre depresión y cambios hormonales en mujeres durante la premenopausia y posmenopausia. Las fluctuaciones de estrógenos afectan el sistema serotoninérgico, modificando la densidad y funcionalidad de los receptores 5-HT1A y 5-HT2A, y alterando la disponibilidad de serotonina, lo que contribuye a la aparición de depresión. Estudios preclínicos demuestran que los estrógenos activan vías celulares como MAP/ERK, TrKB, IGF-1R, PI3/Akt y mGluR1, que influyen en la regulación del estado de ánimo. Comprender estas interacciones entre hormonas y serotonina puede orientar estrategias preventivas, diagnósticos tempranos y tratamientos más eficaces para mujeres climatéricas y posmenopáusicas.

Fecha (año) de inicio de la Investigación

2017

Fecha (año) de fin de la Investigación

2017

Co-autores

Rosa Isela García Ríos, Armando Mora Pérez, Cesar Soria Fregozo

Anxiety in natural and surgical menopause: physiologic and therapeutic bases

Descripción del proyecto de Investigación

El texto aborda el trastorno de ansiedad generalizada, uno de los más comunes a nivel mundial y con mayor prevalencia en mujeres, en una proporción de 2:1 respecto a los hombres. Destaca la influencia de las fluctuaciones hormonales —como las de estradiol, progesterona y alopregnanolona— a lo largo del ciclo reproductivo femenino. Dichos cambios se relacionan con alteraciones emocionales y ansiedad durante el síndrome premenstrual, el posparto y la menopausia. Esta última, ya sea natural o quirúrgica, genera importantes transformaciones fisiológicas y psicológicas, afectando el estado emocional y el equilibrio neuroendocrino de las mujeres en esta etapa de la vida.

Fecha (año) de inicio de la Investigación

2017

Fecha (año) de fin de la Investigación

2017

Co-autores

Rosa Isela García Ríos, Armando Mora Pérez, Cesar Soria Fregozo

 



Association of 5-HT1A receptors with affective disorders

Descripción del proyecto de Investigación

Se analiza el papel de la serotonina (5-HT) y de sus receptores, especialmente el subtipo 5-HT1A, en la regulación del comportamiento motivado y en la fisiopatología de los trastornos afectivos. Estos receptores, presentes en neuronas presinápticas y postsinápticas, participan en los mecanismos de acción de los antidepresivos, como los inhibidores selectivos de la recaptura de serotonina (ISRS) y los tricíclicos. Dichos fármacos aumentan la serotonina sináptica al bloquear su recaptura, lo que induce cambios neuronales y una regulación a la baja de los receptores 5-HT1A. El capítulo revisa la señalización intracelular y farmacología de estos receptores en el tratamiento de los trastornos afectivos.

Fecha (año) de inicio de la Investigación

2017

Fecha (año) de fin de la Investigación

2017

Co-autores

Cesar Soria-Fregozo, Maria Isabel Perez-Vega, Juan Francisco Rodríguez-Landa, León Jesús Germán-Ponciano, Rosa Isela García-Ríos, Armando Mora-Perez


Tesis Dirigidas



Efecto de la administración crónica del extracto acuoso de Justicia spicigera Schltdl (Acanthaceae) sobre las fases del ciclo estral de ratas sometidas al modelo de nado forzado.

Resumen de la Tesis

La Organización Mundial de la Salud (OMS) promueve investigar la medicina tradicional, usada por el 80% de la población. En México, el muicle (Justicia spicigera) se utiliza para diversos fines, incluyendo trastornos del estado de ánimo como la tristeza, pero carece de aval científico que relacione su efecto con las hormonas ováricas.

El objetivo fue identificar el efecto del extracto acuoso de muicle (EAHM) en la desesperanza conductual de ratas (prueba de nado forzado) y su relación con el ciclo estral.

La administración aguda de 12 y 48 mg/kg de EAHM, y el tratamiento crónico (21 días) de 24 y 48 mg/kg, redujeron la inmovilidad (efecto antidepresivo) de manera significativa, similar a la fluoxetina (4 mg/kg), particularmente en las fases de metaestro-diestro (M-D), caracterizadas por bajas concentraciones de hormonas ováricas.

El estudio concluye que el EAHM ejerce efecto antidepresivo a la dosis empleada en la medicina tradicional (24 mg/kg) y que requiere bajas concentraciones de hormonas ováricas para ejercer su efecto antidepresivo. Sugiriendo un efecto de agonismo competitivo, lo cual queda por explorarse.

Fecha (año) de inicio

2018

Status

Concluida

Nombre del Alumno

RICARDO DE JESUS CARPIO REYES

Programa Educativo

Licenciatura en Ingeniería Bioquímica

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No aplica

 



Influencia de las hormonas ováricas sobre la respuesta antidepresiva de fluoxetina: comparación entre ratas ovariectomizadas y ciclantes sometidas a la prueba de nado forzado.

Resumen de la Tesis

Las fluctuaciones hormonales en mujeres (naturales o por menopausia quirúrgica) aumentan la vulnerabilidad a la depresión. Pacientes con depresión resistente responden mejor a dosis bajas de fluoxetina (FLX), que actúa sobre el receptor 5-HT1A. La ovariectomía (OVX) incrementa la densidad de estos receptores, sugiriendo una influencia hormonal en la respuesta antidepresiva.El objetivo fue evaluar el efecto antidepresivo de dosis bajas de FLX en ratas ovariectomizadas (bajas hormonas) comparadas con ratas ciclantes. Se administró FLX (1, 2 y 4 mg/kg) en tratamientos agudos y crónicos. El tratamiento crónico con 1 mg/kg de FLX redujo la actividad locomotora solo en ratas OVX. El tratamiento agudo y crónico con 4 mg/kg de FLX redujo significativamente la inmovilidad (efecto antidepresivo) en ratas OVX. La FLX fue más eficaz en las ratas OVX, e incluso incrementó la inmovilidad en ratas en la fase de proestro-estro (altas hormonas). Se concluye que la dosis de 4 mg/kg de FLX ejerce un efecto antidesesperanza bajo condiciones de bajas hormonas ováricas, estableciendo un antecedente de la importancia de los perfiles hormonales en la dosificación del tratamiento de depresión en mujeres en menopausia.

Fecha (año) de inicio

2020

Status

Concluída

Nombre del Alumno

DIANA PAOLA MARTINEZ ALFEREZ

Programa Educativo

Licenciatura en Ingeniería Bioquímica

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No aplica

 



Análisis etológico de conductas activas y pasivas de ratas hembra Wistar en el modelo de nado forzado en estanque rectangular: influencia del ciclo estral y fluoxetina

Resumen de la Tesis

La prueba de nado forzado es un modelo preclínico que identifica potenciales antidepresivos y la influencia de las hormonas gonadales. Se buscan optimizar las condiciones de ejecución y análisis, evaluando conductas activas como nado y escalamiento, así como pasivas que corresponden a la inmovilidad, bajo un control activo como la fluoetina (FLX).

El objetivo fue evaluar el efecto de la FLX, (4 y 10 mg/kg), en tratamiento agudo y crónico, sobre las conductas de ratas hembras ciclantes (fases P-E y M-D) usando un estanque rectangular.

De manera normal, las ratas en P-E tuvieron mayor escalamiento que las M-D.

El tratamiento agudo de FLX 4 mg/kg no produjo cambios en la prueba de nado en ninguna fase de ciclo en comparación con VEH. Bajo tratamiento crónico incrementó la inmovilidad en la fase de P-E.

El tratamiento con 10 mg/kg de FLX mostró un claro efecto antidepresivo, reduciendo la inmovilidad e incrementando la frecuencia y tiempo de nado, especialmente en la fase M-D, tanto en agudo como crónico. 

Ambas dosis redujeron la actividad locomotriz bajo tratamiento agudo, cambio que se canceló con el tratamiento crónico.

Se concluye que el tratamiento agudo con FLX modifica las conductas activas y pasivas, mientras que el crónico solo altera las pasivas (inmovilidad). El estanque rectangular fue sensible a las diferencias del ciclo estral únicamente en la conducta de escalamiento.

Fecha (año) de inicio

2020

Status

Concluída

Nombre del Alumno

DIANA DE LA RIVA CONTRERAS

Programa Educativo

Licenciatura en Ingeniería Bioquímica

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No aplica

 



Efecto de la ovariectomía sobre la respuesta tipo-antidepresiva de diferentes dosis de fluoxetina e imipramina en ratas Wistar sometidas a la prueba de nado forzado

Resumen de la Tesis

La extirpación de ovarios (ooforectomia), o "menopausia quirúrgica", puede ser un factor de predispósición a padecer depresión, sobre todo si se realiza en la etapa reproductiva de la mujer. La ausencia crónica de hormonas ováricas altera la neurotransmisión de catecolaminas (serotonina y noradrenalina), aumentando transportadores y cambiando receptores, lo que contribuye a la desesperanza y puede ser un factor de farmacorresistencia a diferentes antidepresivos.

El objetivo fue evaluar la respuesta antidepresiva crónica de fluoxetina (FLX) e imipramina (IMI) en ratas ovariectomizadas (bajas hormonas) usando la prueba de nado forzado.

La FLX (4 mg/kg) ejerció un efecto antidepresivo, aumentando la latencia y reduciendo el tiempo de inmovilidad. Sin embargo, la FLX (10 mg/kg) fue ineficaz o contraproducente. La IMI fue ineficaz para modificar los tiempos de inmovilidad, nado o escalamiento.

Se concluye que la ausencia crónica de hormonas ováricas determina el efecto antidepresivo de la FLX a dosis bajas, mientras que impide la acción de la IMI a dosis antidepresivas reportadas. Esto sugiere que la ovariectomía induce cambios neuroquímicos heterogéneos que afectan la respuesta farmacológica.

Fecha (año) de inicio

2021

Status

Concluída

Nombre del Alumno

KAREN SUSANA RUIZ VALDIVIA

Programa Educativo

Licenciatura en Ingeniería Bioquímica

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No aplica

 



Expresión del ARNm para los receptores 5HT1A y 5HT2A en el septum de ratas en las fases de metaestro – diestro forzadas a nadar tratadas con fluoxetina

Resumen de la Tesis

Ratas ciclantes jóvenes en las fases de M-D y OVX adultas muestran mayor vulnerabilidad a desarrollar conductas sugerentes de depresión. 

Las hormonas ováricas producen cambios en los niveles de ARNm de receptores del sistema serotoninérgico como los 5-HT1A y los 5-HT2A y se asocian con el establecimiento del efecto antidepresivo en estructuras cerebrales pertenecientes al sistema límbico. Se ha identificado de un aumento del ARNm de los receptores 5-HT1A en el hipocampo se encuentran asociados al efecto antidepresivo de fluoxetina o preparaciones herbales como el Chaihu-Shugan-San en ratas wistar. Mientras que, se ha identificado una reducción del ARNm de los receptores 5-HT2A en la corteza prefrontal de pacientes con depresión mayor y el antagonismo de dichos receptores produce efectos antidepresivos en modelos animales.

El objetivo fue evaluar si el tratamiento crónico con fluoxetina disminuye la expresión del ARNm para los receptores 5-HT1A y 5-HT2A en el septum de ratas adultas en las fases de M-D sometidas a la prueba de nado forzado.

No se identificaron cambios en los niveles de ARNm para los receptores 5-HT1A y 5-HT2A en el septum de ratas que presentaron efecto antidepresivo en la prueba de nado forzado bajo tratamiento crónico con 4 mg/kg de fluoxetina.

Se concluye que el efecto antidepresivo del tratamiento crónico con fluoxetina se establece sin modificar la expresión del ARNm para los receptores 5-HT1A y 5-HT2A en el septum de ratas en la fase de M-D.

Fecha (año) de inicio

2024

Status

Concluída

Nombre del Alumno

ARELI JULISA LUNA MUÑOZ

Programa Educativo

Licenciatura en Ingeniería Bioquímica

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No aplica

 



Participación de los receptores 5HT1A y GABAA en el efecto antidepresivo de la infusión de Justicia spicigera Schltdl en ratas hembras ciclantes

Resumen de la Tesis

El muicle (Justicia spicigera) se utiliza tradicionalmente para la tristeza, mostrando efectos antidepresivos similares a fármacos convencionales en estudios preclínicos. Su infusión contiene esteroles, flavonoides y terpenos, metabolitos asociados a mecanismos GABAérgicos y/o serotonérgicos.

Aunque se sabe que la combinación de medicamentos GABAérgicos y serotonérgicos aumenta la eficacia antidepresiva, el mecanismo exacto del muicle era desconocido.

El estudio concluyó que el antagonismo de los receptores 5-HT1A y GABAA cancela el efecto antidepresivo crónico de la infusión en ratas en la prueba de nado forzado. Esto evidencia que el efecto antidepresivo del muicle se ejerce a través de un sinergismo farmacológico con dichos sistemas de neurotransmisión.

Fecha (año) de inicio

2024

Status

Concluída

Nombre del Alumno

EVELYN JAZMÍN FRANCO ÁVILA

Programa Educativo

Licenciatura en Ingeniería Bioquímica

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No aplica

 



Participación de receptores D1, GABA-A, β1-adrenoreceptores y cambios sobre los niveles de neurotransmisores en el cerero de ratas macho sobre el efecto antidepresivo de la infusión de las hojas de Justicia spicigera

Resumen de la Tesis

La depresión es la segunda causa de discapacidad alrededor del mundo. Los efectos secundarios, los costos de los tratamientos y el hecho de que aproximadamente del 20 al 40% de los pacientes no responden al tratamiento, ha incrementado la búsqueda de terapias alternativas en la medicina tradicional.

Justicia spicigera en infusión ha demostrado producir efectos antidepresivos en ratas macho y hembra en dosis de 48 mg/kg. En el caso de las hembras ya se ha explorado que el mecanismo involucra la participación de los receptores 5-HT1A y GABAA, mismos sobre los cuales moleculas como terpenos, esteroles y flavonoides han demostrado ejercen modulación. Sin embargo, también se han involucrado los receptores a dopamina D1 y β1- adrenoreceptores. Dicha modulación puede causar cambios en los niveles de neurotransmisores, así como en la neurotransmisión misma.

El objetivo es identificar el mecanismo de acción del efecto antidepresivo de la IHJs, mediante el antagonismo de los receptores D1, GABA-A, β1- adrenoreceptores en ratas Wistar macho, así como analizar los cambios en el metabolismo de neurotransmisores en el cerebro, mediante cuantificación de 5-HT y 5-HIIA por HPLC.

Fecha (año) de inicio

2024

Status

En proceso

Nombre del Alumno

CARLOS ANDRÉS CONTRERAS SALAZAR

Programa Educativo

Doctorado en Ciencia y Tecnología

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No aplica aún


Publicaciones

  • Rosas-Sánchez, G. U., Germán-Ponciano, L. J., Rodríguez-Landa, J. F., Bonilla-Jaime, H., Limón-Morales, O., García-Ríos, R. I., Muñoz-Carrillo, J. L., Gutiérrez-Coronado, O., Villalobos-Gutiérrez, P. T., & Soria-Fregozo, C. (2025). Estrogenic Effect of Probiotics on Anxiety and Depression: A Narrative Review. International Journal of Molecular Sciences, 26(20), 9948. DOI: https://doi.org/10.3390/ijms26209948
  • García-Ríos, R.I., Mora-Pérez, A., González-Torres, D., Carpio-Reyes, R.D.J., Soria-Fregozo, C. Anxiolytic-like effect of the aqueous extract of Justicia spicigera leaves on female rats: A comparison to diazepam. (2019) Phytomedicine, 55, pp. 9-13. Cited 13 times. DOI: https://doi.org/10.1016/j.phymed.2018.07.007 
  • Contreras, C.M., Rodríguez-Landa, J.F., García-Ríos, R.I., Cueto-Escobedo, J., Guillen-Ruiz, G., Bernal-Morales, B. Myristic Acid Produces Anxiolytic-Like Effects in Wistar Rats in the Elevated Plus Maze. (2014) BioMed Research International, 2014, art. no. 492141. Cited 50 times. DOI: https://doi.org/10.1155/2014/492141 
  • Rodríguez-Landa, J.F., García-Ríos, R.I., Cueto-Escobedo, J., Bernal-Morales, B., Contreras, C.M. Participation of GABA a chloride channels in the anxiolytic-like effects of a fatty acid mixture. (2013) BioMed Research International, 2013, art. no. 121794. Cited 17 times. DOI: https://doi.org/10.1155/2013/121794 
  • García-Ríos, R.I., Rodríguez-Landa, J.F., Contreras, C.M. Anxiolytic-like actions of fatty acids identified in human amniotic fluid. (2013) The Scientific World Journal, 2013, art. no. 823289. Cited 4 times. DOI: https://doi.org/10.1155/2013/823289 
  • Contreras, C.M., Rodríguez-Landa, J.F., Gutiérrez-García, A.G., Mendoza-López, M.R., García-Ríos, R.I., Cueto-Escobedo, J. Anxiolytic-like effects of human amniotic fluid and its fatty acids in wistar rats. (2011) Behavioural Pharmacology, 22 (7), pp. 655-662. Cited 25 times. DOI: https://doi.org/10.1097/FBP.0b013e32834aff3d 
  • Rodríguez-Landa, J.F., Contreras, C.M., García-Ríos, R.I. Allopregnanolone microinjected into the lateral septum or dorsal hippocampus reduces immobility in the forced swim test: Participation of the GABAA receptor. (2009) Behavioural Pharmacology, 20 (7), pp. 614-622. Cited 43 times. DOI: https://doi.org/10.1097/FBP.0b013e328331b9f2